高效液相色谱仪检测波长设定标准
2014-12-29
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高效液相色谱仪检测波长测准时一样平常都选择在对样品有最大吸收的波长下举行,以获得最大的迅速度和抗滋扰能力。但应特殊注重在选择测定波长时,必需思量到所使用的流动相的紫外吸收性子。也就是说,使用紫外-可见光检测器时,溶剂不应吸收测定波长的紫外光,样品测定波长应当在溶剂紫外吸收波长上限以上。噪声降至10-4~10-5AU,才华包管检测的迅速度,才华用于梯度洗脱。
溶剂吸收波长的上限,就是透过波长的下限。波长的下限划定为溶剂在以空气为参比,样品池厚度为1厘米的条件下,恰恰爆发1.0吸光度时相对应的波长值,即溶剂透过率为10%时的波长。
溶剂中若是含有吸收紫外光的杂质,同样会使检测配景提高,迅速度降低,且用作梯度洗脱时会引起严重漂移。因此,液相色谱系统对溶剂纯度要求较高,一样平常应使用分光纯或剖析纯溶剂,在有条件时,色谱纯溶剂为首选。应注重不可使用化学纯及纯度更低的溶剂。有时需要对溶剂举行专门纯化处置惩罚。
常用溶剂透过波长下限